西尼罗病毒荧光定量PCR检测体系的建立及评价

• 作者: 史利军 吕茂民 孙卫华 尹惠琼 章金刚 黎诚耀
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 西尼罗病毒 Caspid蛋白基因 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 748-751
• 页数: 4页
• 分类号: S188
• 字数: 2510字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2008.05.004

摘要

建立了一种实时荧光定量PCR快速检测西尼罗病毒(West nile virus,WNV)的方法.通过序列比对和blast分析,确定WNV Caspid蛋白保守区基因为检测的目的基因,引物采用Primer Prernier5.0软件设计.利用成本相对较低的SYBR Green Ⅰ染料法建立WNV核酸检测方法.通过对标准品的扩增、测序及对标准扩增曲线的绘制,建立WNV核酸检测体系.同时对建立的检测体系进行了检测特异性、灵敏度和重复性分析.将阳性对照标准品进行10倍梯度稀释后可检测到102 copies/μL样品,表明该检测体系具有较高的检测灵敏度.通过分析表明,本检测体系在用空白对照及类似的乙脑病毒作为扩增对照时,没有发现非特异性产物的生成,表明该体系对于WNV的检测是特异的.通过4次批间重复检测,体系的变异系数小于2%,表明该检测体系具有良好的可重复性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕茂民	军事医学科学院野战输血研究所	56	376	11.0	16.0
2	章金刚	华中农业大学动物医学院	124	845	15.0	21.0
4	尹惠琼	军事医学科学院野战输血研究所	18	97	7.0	9.0
5	黎诚耀	南方医科大学生物技术学院	36	184	8.0	11.0
6	史利军	华中农业大学动物医学院	10	50	5.0	6.0
10	孙卫华	军事医学科学院野战输血研究所	4	18	2.0	4.0