抗人SUMO1蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 彭小忠 王林 谭锋维 陆丽芳 陈实平 龚燕华
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: SUMO 蛋白表达纯化 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 623-626
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2171字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2008.06.020

摘要

目的 表达重组人SUMO1(small ubiquitin-related modifier 1)蛋白并制备单克隆抗体.方法 构建含人SUMO1基因的重组表达质粒pET32a-HIS-SUMO1,在大肠杆菌中表达重组蛋白HIS-SUMO1;以纯化后的HIS-SUMO1蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术,通过ELISA和Western blot方法筛选稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,用免疫双向扩散法鉴定抗体Ig的类型及亚类;取一株筛选细胞按照常规方法制备腹水,利用Millipore抗体纯化试剂盒进行抗体纯化,Western blot方法检测抗体效价.结果 表达纯化了重组人HIS-SUMO1蛋白;3株稳定分泌特异性抗人SUMO1的单克隆抗体杂交瘤细胞株被筛选出,其免疫球蛋白类型均为IgG1类;通过腹水制备和纯化获得效价较高的鼠抗人SUMO1单克隆抗体.结论 通过表达纯化人SUMO1重组蛋白,制备出高效价鼠抗人SUMO1的单克隆抗体,该抗体可用于蛋白质SUMO化的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭小忠		9	59	3.0	7.0
7	龚燕华		2	0	0.0	0.0
10	王林		8	4	1.0	1.0
22	谭锋维		6	42	4.0	6.0
28	陆丽芳		2	5	1.0	2.0