产甘油假丝酵母胞浆3-磷酸甘油脱氢酶基因(CgGPD)功能分析

• 作者: 方慧英 沈微 王正祥 诸葛健 诸葛斌 陈献忠 饶志明
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 产甘油假丝酵母 3-磷酸甘油脱氢酶 甘油合成 渗透压胁迫
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 生理和代谢
• 页码范围: 1602-1608
• 页数: 7页
• 分类号: Q935
• 字数: 4263字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2008.12.006

摘要

[目的]从高产甘油生产菌株产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)基因组中克隆了NAD+依赖3-磷酸甘油脱氢酶编码基因(CgGPD),但是该基因及其上游调控序列具体的功能还是未知的.本文研究了CgGPD基因及其上游调控序列的功能.[方法]本文以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)及其渗透压敏感型突变株为宿主,构建3种不同的酵母表达载体导人酵母细胞,研究了不同酵母转化子在渗透压胁迫条件下CgGPD基因表达对细胞的耐高渗透压胁迫应答及其细胞的甘油合成能力的影响.[结果]实验结果表明无论是以来源于S.cerevisiae的TPI启动子还是来源于CgGPD基因的启动子,过量表达CgGPD基因的转化子均能够显著加速葡萄糖消耗速度和提高甘油合成能力,在gPdl/8,d2突变株中表达CgGPD基因能够消除细胞对外界高渗透压的敏感性,同时转化子胞内甘油大量积累.[结论]CgGPD基因在野生型酵母S.cerevisiao W303-IA表达显著提高细胞的甘油合成能力,在gPdllgPd2突变株中能够互补GPD1基因的功能,CgGPD基因表达受渗透压诱导调控.