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摘要:
目的 构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)黏附素(HpaA)和尿素酶B亚单位(UreB)双亚基多表位疫苗,并对其免疫原性进行研究.方法 设计引物采用PCR法将黏附素(HpaA)的一个B细胞表位与尿素酶B亚单位的三个TH表位及一个B细胞表位串联起来(HUepi),表位之间用两个赖氨酸(KK)间隔,T-A克隆后构建融合基因表达质粒pET-22b(+)-HUepi,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,重组蛋白采用阳离子和疏水层析进行纯化,经鉴定后皮下免疫BALB/c小鼠,检测细胞免疫应答及体液免疫应答.结果 PCR法扩增出了约233bp的目的 片段;原核表达质粒pET-22b(+)-HUepi经酶切及测序鉴定,目的 基因序列与设计序列一致;重组蛋白HUepi表达率约20.0%,PAGE初步测定目的 蛋白的相对分子质量(Mr)约8.38×103Dr,破菌后电泳证实目的 蛋白以可溶形式表达,纯化后蛋白纯度大于97.6%,经N端测序证实为设计的表位疫苗蛋白,TH表位多肽、表位疫苗蛋白及rUreB均能够刺激表位疫苗致敏的小鼠淋巴细胞增殖(SI>2),并且此疫苗能够刺激机体产生特异性抗体.结论 Hp HpaA、UreB双亚基表位疫苗HUepi经基因克隆获得了较高的表达量,并初步显示了较好的免疫原性.为新一代Hp疫苗的研制奠定实验基础.
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文献信息
篇名 幽门螺杆菌双亚单位表位疫苗的构建及免疫原性研究
来源期刊 中国人兽共患病学报 学科 医学
关键词 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp) 粘附素(HpaA) 尿素酶B亚单位(UreB) 表位疫苗
年,卷(期) 2008,(1) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 33-37,66
页数 6页 分类号 R378
字数 4082字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.01.009
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 邹全明 第三军医大学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心 258 1589 19.0 26.0
2 吴超 第三军医大学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心 46 218 8.0 11.0
3 石云 第三军医大学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心 19 99 7.0 9.0
4 周维英 第三军医大学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心 25 115 7.0 9.0
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研究主题发展历程
节点文献
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)
粘附素(HpaA)
尿素酶B亚单位(UreB)
表位疫苗
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国人兽共患病学报
月刊
1002-2694
35-1284/R
大16开
福建省福州市津泰路76号
34-46
1985
chi
出版文献量(篇)
6893
总下载数(次)
10
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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