幽门螺杆菌双亚单位表位疫苗的构建及免疫原性研究

• 作者: 吴超 周维英 石云 邹全明
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp) 粘附素(HpaA) 尿素酶B亚单位(UreB) 表位疫苗
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 33-37,66
• 页数: 6页
• 分类号: R378
• 字数: 4082字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.01.009

摘要

目的 构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)黏附素(HpaA)和尿素酶B亚单位(UreB)双亚基多表位疫苗,并对其免疫原性进行研究.方法 设计引物采用PCR法将黏附素(HpaA)的一个B细胞表位与尿素酶B亚单位的三个TH表位及一个B细胞表位串联起来(HUepi),表位之间用两个赖氨酸(KK)间隔,T-A克隆后构建融合基因表达质粒pET-22b(+)-HUepi,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,重组蛋白采用阳离子和疏水层析进行纯化,经鉴定后皮下免疫BALB/c小鼠,检测细胞免疫应答及体液免疫应答.结果 PCR法扩增出了约233bp的目的 片段;原核表达质粒pET-22b(+)-HUepi经酶切及测序鉴定,目的 基因序列与设计序列一致;重组蛋白HUepi表达率约20.0%,PAGE初步测定目的 蛋白的相对分子质量(Mr)约8.38×103Dr,破菌后电泳证实目的 蛋白以可溶形式表达,纯化后蛋白纯度大于97.6%,经N端测序证实为设计的表位疫苗蛋白,TH表位多肽、表位疫苗蛋白及rUreB均能够刺激表位疫苗致敏的小鼠淋巴细胞增殖(SI＞2),并且此疫苗能够刺激机体产生特异性抗体.结论 Hp HpaA、UreB双亚基表位疫苗HUepi经基因克隆获得了较高的表达量,并初步显示了较好的免疫原性.为新一代Hp疫苗的研制奠定实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹全明	第三军医大学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心	258	1589	19.0	26.0
2	吴超	第三军医大学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心	46	218	8.0	11.0
3	石云	第三军医大学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心	19	99	7.0	9.0
4	周维英	第三军医大学检验系临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心	25	115	7.0	9.0