幽门螺杆菌HpaA减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗的构建及免疫原性检测

• 作者: 孙波 屠振兴 徐灿 李兆申 杜奕奇 杨哗 许国铭 金晶 龚燕芳
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 疫苗 载体 鼠伤寒沙门菌
• 年，卷（期）: 2004,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 667-669,673
• 页数: 4页
• 分类号: R73|Q31.1
• 字数: 2932字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2004.08.007

摘要

目的构建含幽门螺杆菌(H.pylori)hpaA基因的重组减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗.方法应用PCR方法从H.pylori标准菌株基因组DNA中扩增hpaA基因,克隆入pUCmT载体,检测hpaA基因序列,经过酶切、连接反应将其克隆入真核表达载体pIRES,转入大肠杆菌,筛选阳性克隆,通过PCR和酶切反应鉴定.重组载体pIRES-hpaA转化入减毒鼠伤寒沙门菌LB5000,抽提质粒,再转化入SL7207,反复传代,鉴定重组核酸疫苗菌的稳定性.重组载体pIRES-hpaA通过脂质体法转染COS-7细胞,SDS-PAGE及Western印迹法检测pIRES-hpaA表达HpaA蛋白的免疫原性.结果成功扩增出长约750bp的hpaA基因,测序结果表明扩增出的hpaA基因与H.pylori hpaA序列一致,PCR和酶切鉴定结果证实hpaA基因克隆入真核表达载体pIRES,成功构建了含hpaA基因的幽门螺杆菌核酸疫苗pIRES-hpaA,并成功构建了幽门螺杆菌hpaA基因的减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗,重组核酸疫苗稳定,Western印迹法.检测到了特异性的蛋白条带.结论构建了具有免疫反应性的H.pylori hpaA减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗,为进一步探索其免疫作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李兆申		1030	7581	34.0	55.0
2	徐灿		36	157	7.0	9.0
3	杜奕奇		67	657	14.0	23.0
4	屠振兴		90	564	13.0	20.0
5	龚燕芳		120	602	12.0	17.0
6	许国铭		279	2118	23.0	34.0
7	金晶		47	145	7.0	8.0
8	孙波		13	51	5.0	6.0
9	杨哗		1	5	1.0	1.0