幽门螺杆菌hpaA基因在乳酸菌中的表达及免疫原性分析

• 作者: 刘娟 孙振璐 宫连凤 彭世泽 王志昱 韩文清 高巧
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 乳酸乳球菌 hpaA基因
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1007-1011
• 分类号: R378.2
• 字数: 3888字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2012.10.010

摘要

目的 在乳酸菌中表达幽门螺杆菌(HP)hpaA基因,口服免疫小鼠后检测其免疫原性.方法 PCR方法从基因组中扩增基因hpaA,将其克隆至表达载体pNICE:sec,将重组质粒转化乳酸菌NZ9000株,筛选鉴定阳性菌落,诱导表达的hpaA蛋白用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定.将雌性ICR(CV级)小鼠随机分为4组,分别用PBS、携带空质粒的乳酸菌、携带pNICE:sec-hpaA的乳酸菌、灭活的HP灌胃.免疫7次后检测其特异性IgG和IgA的产生.结果 扩增hpaA基因并构建了重组原核表达质粒pNICE:sec-hpaA,转化乳酸菌NZ9000后经nisin诱导可表达Mr分子量约29 kD的重组蛋白,表达量约占菌体总蛋白量的9.3%,Western blot分析其能与幽门螺杆菌抗血清特异性反应,具有良好的免疫原性.携带pNICE:sec-hpaA质粒的乳酸菌刺激产生的IgG水平明显高于携带空质粒组,与灭活HP组没有明显的差异,但其刺激产生的IgA水平明显高于其它组(P<0.05).结论 表达hpaA蛋白的乳酸菌口服免疫小鼠后,能够刺激小鼠产生特异的IgG和IgA,可作为幽门螺杆菌口服疫苗候选抗原.为乳酸菌作为抗原递送载体的研究和HP口服疫苗的开发提供一定的实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宫连凤		17	84	5.0	8.0
2	刘娟		19	85	5.0	8.0
3	韩文清		15	75	6.0	7.0
4	高巧		10	40	4.0	6.0
5	王志昱		19	53	5.0	7.0
6	孙振璐		12	40	4.0	6.0
7	彭世泽		1	5	1.0	1.0