猪带绦虫六钩蚴45W-4BX抗原的制备及其杂交瘤细胞株的建立

• 作者: LUO Xue-nong 孙晓林 才学鹏 景志忠 王佩雅 骆学农
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪带绦虫 六钩蚴 TSO45W-4BX抗原 杂交瘤细胞
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 91-96
• 页数: 6页
• 分类号: S852.734|Q78
• 字数: 5586字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2008.02.001

摘要

为获得针对猪带绦虫六钩蚴(TSO)45W-4BX抗原的杂交瘤细胞株,用IPTG对TS045W-4BX的重组质粒pGEX-4BX进行了诱导表达,并采用Sepharose-4B层析技术对表达产物进行纯化,运用SDS-PAGE和Western-blot分别对其纯度和活性进行了检测.分别用弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂乳化已纯化的猪带绦虫TS045W-4BX重组抗原,随后用其分别免疫BALB/c小鼠3次,检测血清抗体效价呈阳性.之后,再进行加强免疫,取免疫小鼠脾细胞和SP2/0细胞进行融合,经TS045W-4BX抗原和GST抗原双系统间接ELISA筛选,最终获得了18株抗TS045W-4BX抗原的杂交瘤细胞株.采用有限稀释法对其中的4株进行5次亚克隆,最终获取了4株稳定分泌针对TS045W-4BX抗原的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,金标试纸条法鉴定其抗体亚类均属于IgG1类,轻链为κ型.