猪带绦虫45W-4BX和TSOL18的高效表达及免疫效果研究

• 作者: 丁军涛 侯俊玲 张少华 才学鹏 景志忠 窦永喜 胡志敏 郑亚东 郭爱疆 骆学农
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪带绦虫 TSOL18 45W-4BX 疫苗 保护效果
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 212-217
• 页数: 6页
• 分类号: S855.9|S852.73+4|R383.3
• 字数: 4669字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2008.02.014

摘要

RT-PCR扩增45W-4B和TSOL18基因,PCR截去45W-4B基因的N端信号肽和C端疏水氨基酸序列形成45W-4BX.将45W-4BX和TSOL18 PCR产物分别亚克隆人pGEX-4T-1,用IPTG诱导表达,取产物进行SDS-PAGE和Western blot分析.纯化表达产物制成油佐剂疫苗分别免疫家猪,用25 000枚猪带绦虫成熟虫卵进行攻击感染,ELISA检测各组的抗体水平,90 d后剖检计算各组的减虫率.结果表明,45W-4BX和TSOL18基因在大肠杆菌中分别以可溶性和包涵体形式获得高效表达,并能被囊虫病人血清所识别.重组蛋白免疫猪15 d血清抗体即为阳性,30 d左右达到峰值.2种重组抗原的减虫率均在88%以上,与囊虫粗抗原免疫效果相当.这为进一步研制基于45W-4BX和TSOL18的猪囊虫重组基因工程疫苗奠定了基础.