Tsol18基因密码子优化对其表达及重组蛋白免疫效果的影响

• 作者: 丁军涛 张少华 才学鹏 景志忠 王颖 郑亚东 陈晓宇 骆学农
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪带绦虫六钩蚴 Tsol18-sp 基因修饰 抗原性
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 409-415
• 页数: 7页
• 分类号: S852.734|R383
• 字数: 4401字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2009.03.021

摘要

定点突变猪带绦虫六钩蚴(oncosphere)Tsol18基因的4个碱基,并截去其N端16氨基酸信号肽的编码序列,构建pGEX-Tsol18-sp表达载体,IPTG诱导表达后进行产物的SDS-PAGE、Western blot及稳定性分析;取该基因修饰前、后所表达的重组蛋白免疫猪,以ELISA检测抗体水平,并通过屠宰检虫评价、比较免疫效果.结果显示:修饰后的Tsol18-sp基因共有7个碱基发生同义突变,表达产物主要是约38.7 ku的可溶性融合蛋白,在4℃保存2个月后约降解20.1%,能与猪带绦虫六钩蚴阳性血清反应;TSOL18和TSOL18-sp抗原免疫试验猪后均能诱导高水平抗体的产生,但TSOL18-sp抗原的保护率较TSOL18抗原有明显的提高(100%vs 20%).表明Tsol18经修饰后,其重组表达产物的生物学活性和稳定性都有很大改善,可作为囊虫病免疫预防的候选抗原.