猪带绦虫TSOL18基因的表达、纯化和兔抗血清的制备

• 作者: 刘晖 刘美辰 周必英 周泠 张曦
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 猪带绦虫 TSOL18 重组蛋白 抗血清 制备
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 977-980,985
• 页数: 5页
• 分类号: R383.33
• 字数: 3674字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2013.10.008

摘要

目的 构建猪带绦虫重组质粒pGEX-TSOL18,表达纯化TSOL18重组蛋白,制备兔抗重组蛋白血清.方法 全基因合成猪带绦虫TSOL18抗原编码基因,定向克隆到pGEX-1λT表达载体,构建重组质粒pGEX-TSOL18;转化大肠埃希菌ArcticExpress(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达情况；亲和层析纯化获得重组蛋白,免疫兔制备抗血清；ELISA测定抗血清的效价,Western blot鉴定抗血清的特异性.结果 全基因扩增出393 bp的TSOL 18抗原编码基因,酶切和测序鉴定证实TSOL18基因成功插入pGEX-1λT中；SDS PAGE分析显示表达重组蛋白相对分子质量(Mr)约为41 kDa,经亲和层析后可获得纯度为75％的重组蛋白；ELISA测定抗血清的效价为1∶256 000,Western blot证实该抗血清能与重组蛋白发生特异性反应.结论 猪带绦虫TSOL18基因能在大肠埃希菌中高效表达,成功制备了高纯度的TSOL18重组蛋白和高滴度的兔抗重组蛋白血清,为猪带绦虫的疫苗研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘晖	遵义医学院寄生虫学教研室	89	374	12.0	14.0
2	张曦	遵义医学院寄生虫学教研室	36	202	9.0	12.0
3	周必英	遵义医学院寄生虫学教研室	59	216	9.0	11.0
4	周泠	遵义医学院附属第一医院中医科	30	196	8.0	13.0
5	刘美辰	遵义医学院寄生虫学教研室	19	89	6.0	9.0