猪带绦虫组织蛋白酶B基因的克隆表达及抗血清的制备

• 作者: 孙铭苑 才学鹏 方怀盛
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪带绦虫 组织蛋白酶B 序列分析 原核表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2015,（16）
• 所属期刊栏目: 动物科学·饲料科学
• 页码范围: 132-135
• 页数: 4页
• 分类号: S858.28
• 字数: 4225字
• 语种: 中文

摘要

[目的]探索猪带绦虫组织蛋白酶B基因克隆、原核表达及抗血清制备的方法.[方法]根据从GeneDB获得的猪带绦虫组织蛋白酶B的基因序列设计特异性引物,以猪带绦虫的cDNA为模板,扩增出猪带绦虫组织蛋白酶B基因的开放阅读框.将去掉信号肽的部分进行了原核表达,用重组蛋白免疫青紫蓝灰兔,并制备高效价抗血清.[结果]成功克隆了猪带绦虫组织蛋白酶B基因的开放阅读框序列,将其命名为TscpB,长度为1 074 bp,编码357个氨基酸,理论蛋白分子质量约为39.71 ku,具有组织蛋白酶B的特征结构域.采用大肠杆菌原核表达系统对目的蛋白进行大量表达,成功获得了大小约38 ku的猪带绦虫组织蛋白酶B的重组蛋白,此目的蛋白以包涵体的形式存在.Western blotting表明,猪囊尾蚴病阳性血清可以与纯化的重组蛋白发生特异性结合,说明被猪囊尾蚴感染过的猪血清中存在组织蛋白酶B的抗体.[结论]猪带绦虫组织蛋白酶B重组质粒能在大肠杆菌系统中高效表达,且该蛋白具有较高的免疫活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	才学鹏	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室	141	790	15.0	21.0
2	孙铭苑	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室	2	0	0.0	0.0
3	方怀盛	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室	1	0	0.0	0.0