人胚胎干细胞体外培养、传代及冻存、复苏研究

• 作者: 彭红梅 李亚里 杨怡卓 王晶 闫志风
• 来源期刊: 中国优生与遗传杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人胚胎干细胞 体外培养 程序降温法冷冻 复苏
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 分子、生化遗传学与PCR技术
• 页码范围: 17-19,61
• 页数: 4页
• 分类号: R321-33
• 字数: 3934字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-9534.2008.02.008

摘要

目的 建立人胚胎干细胞体外培养模式,并对其进行冻存及复苏. 方法将人胚胎干细胞置于小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上培养,细胞接近融合状态时进行传代,程序降温法冻存,速溶方法复苏,确定解冻后细胞复苏率、克隆生长与分化情况,并对其生物学特性进行鉴定. 结果 人胚胎干细胞稳定增殖了5个月,传至20代;细胞在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上呈集落生长,核大,核仁明显.程序降温法冻存后复苏,细胞复苏率达到78.3%;解冻后第12代细胞仍具有稳定的46,XX核型;TRA-1-81阳性,表达Nanog基因,流式细胞术检测SSEA-4阳性表达率为89.38%.结论成功建立了人胚胎干细胞体外培养模式,为研究人胚胎干细胞及相关疾病的防治提供细胞模型和细胞来源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李亚里	解放军总医院妇产科	179	1737	21.0	35.0
2	彭红梅	解放军总医院妇产科	39	209	7.0	13.0
3	王晶	解放军总医院妇产科	84	623	14.0	20.0
4	闫志风	解放军总医院妇产科	23	97	6.0	9.0
5	杨怡卓	解放军总医院妇产科	22	235	8.0	15.0