MMP-9基因RNAi重组慢病毒的构建及其对喉癌细胞侵袭的抑制

• 作者: 刘鸣 孙亚男 孙艳 焦慧 田霖丽
• 来源期刊: 中国耳鼻咽喉头颈外科
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 明胶酶B 肿瘤 慢病毒属
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 391-393
• 页数: 3页
• 分类号: R73
• 字数: 2924字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-7002.2008.07.004

摘要

目的 构建基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)重组慢病毒,观察其对喉癌细胞体外侵袭的抑制作用.方法 筛选确定的MMP-9基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,与含H1启动子和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的pLVTHM载体连接产生LV2shMMP-9慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定.用重组慢病毒体外转导喉癌细胞,Southern印迹法检测喉癌细胞MMP-9蛋白表达.Boyden侵袭小室法实验观察转导后的喉癌细胞侵袭能力的变化.结果 成功构建MMP-9 shRNA的慢病毒载体LV2shMMP-9,包装慢病毒,浓缩病毒悬液的滴度为8×1010TU/L.转导MMP-9 siRNA的喉癌细胞MMP-9蛋白表达阴性.MMP-9 siRNA转导后喉癌细胞体外侵袭能力下降.结论 成功构建人MMP-9基因RNAi慢病毒载体,MMP-9基因沉默对喉癌细胞体外侵袭有明显的抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙艳	哈尔滨医科大学附属第二医院耳鼻咽喉科	24	32	3.0	4.0
2	孙亚男	哈尔滨医科大学附属第二医院耳鼻咽喉科	40	178	7.0	11.0
3	田霖丽	哈尔滨医科大学附属第二医院耳鼻咽喉科	21	45	4.0	5.0
4	刘鸣	哈尔滨医科大学附属第二医院耳鼻咽喉科	44	131	6.0	9.0
5	焦慧	哈尔滨医科大学附属第二医院耳鼻咽喉科	2	11	2.0	2.0