LAMA4基因对喉癌细胞增殖和侵袭的调控机制

• 作者: 李群 沈志森 邬振华 龚朝晖
• 来源期刊: 浙江医学
• 关键词: 基因 喉癌 慢病毒 侵袭能力 增殖
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 863-866
• 页数: 4页
• 字数: 4091字
• 语种: 中文

摘要

目的构建层粘连蛋白α4亚基（LAMA4）的过表达和干扰序列重组慢病毒，观察其对Hep-2喉癌细胞株增值和侵袭的调控机制。方法全基因合成LAMA4序列并筛选有效的LAMA4基因干扰序列，重组入带有绿色荧光蛋白慢病毒载体。采用慢病毒感染喉癌细胞株Hep-2后，通过Western blot检测过表达和干扰效率。MTT法检测LAMA4基因表达变化时Hep-2细胞株增殖能力的变化。Transwel 实验检测喉癌细胞株感染前后侵袭能力的变化。利用Western blot和Real- time PCR检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)与膜型基质金属蛋白酶(MT1- MMP)的基因表达量变化情况。结果（1）携带LAMA4基因片段和小干扰片段的重组慢病毒成功构建，包装慢病毒后浓缩病毒悬液滴度达到5×105 TU/μl。（2）基因沉默组LAMA4蛋白相对表达量明显低于对照组，过表达组相对表达量明显高于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。（3）LAMA4干扰慢病毒感染Hep-2喉癌细胞株后，细胞株增殖无明显变化。（4）Transwel 小室检测发现，基因沉默组及过表达组Transwel 细胞数与对照组的差异均有统计学意义（均P＜0.05）。（5）与对照组比较，基因沉默组及过表达组MMP-2及MT1- MMP基因与蛋白表达均发生明显变化，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论 LAMA4基因可能是通过MMP-2和MT1- MMP基因相关通路调节喉癌细胞的侵袭能力，LAMA4可以作为治疗喉癌转移的潜在靶点。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李群	宁波大学医学院生物化学与分子生物学研究所	5	24	4.0	4.0
2	龚朝晖	宁波大学医学院生物化学与分子生物学研究所	1	5	1.0	1.0