抗禽流感病毒M2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 张莉 李永清 杨敬 韦莉
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 禽流感病毒 M2蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 475-478
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4377字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2008.05.014

摘要

目的:制备抗禽流感病毒M2蛋白的单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定.方法:利用纯化的融合蛋白GST-M2免疫BALB/c小鼠,然后以GST-M2 和 GST分别作为ELISA抗原进行筛选,选择GST-M2抗原检测强阳性、GST抗原检测阴性的杂交瘤细胞进行克隆,建立能稳定分泌抗AIV M2 mAb的杂交瘤细胞株.mAb的效价采用间接ELISA和琼脂扩散试验(AGP)测定,用夹心ELISA测定Ig亚类,Western blot、抗原捕获ELISA、间接免疫荧光及免疫组化染色法检测 mAb 的特性.结果:得到4株分泌抗禽流感病毒M2蛋白的mAb的杂交瘤细胞株1E1、2F8、4E3 和 5D6,小鼠腹水中抗体的ELISA效价大于210×100、AGP效价大于1:4.抗体亚类鉴定1E1和4E3为IgG2a,2178和5G6为IgG2b.抗原捕获ELISA表明,2F8 wAb能与H5、H9亚型AIV发生特异性反应,而不能与鸡新城疫病毒(NDV)和鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)反应.IFA和免疫组化试验表明,2F8 mAb能够与感染了禽流感病毒的MDCK细胞以及鸡体组织细胞发生特异性结合.结论:本研究获得4株抗禽流感病毒M2蛋白的mAb,其中2F8mAb的效价高、特异性强,可作为检测AIV方法的核心试剂.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张莉	北京市农林科学院畜牧兽医研究所	58	245	9.0	12.0
2	韦莉	北京市农林科学院畜牧兽医研究所	13	121	7.0	11.0
3	杨敬	军事医学科学院实验动物中心	30	191	8.0	12.0
4	李永清	北京市农林科学院畜牧兽医研究所	43	245	9.0	14.0