突变的大肠癌线粒体DNA转染NIH3T3及LST细胞的研究

• 作者: 姬宏莉 宋卫兵 张振书 毛丹 王新颖 肖冰
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 文学
• 关键词: 线粒体DNA D-环区 突变 质粒pcDNA3.1(+) 转染
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1496-1499,1502
• 页数: 5页
• 分类号: Q754|IL574.6
• 字数: 4333字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2008.11.007

摘要

目的 了解大肠癌细胞株(SW480,LOVO,HT29)线粒体DNA的突变,克隆突变的大肠癌线粒体DNA(mtDNA)基因,构建pcDNA3.1(+)-mtDNA真核表达重组体,并导人NIH3T3及LST细胞,以探讨线粒体基因突变与肿瘤发生的关系.方法 提取大肠癌细胞株(SW480,LOVO,HT29)mtDNA,扩增D-LOOP区,产物用DNA自动测序法进行序列分析.利用DNA重组技术将其定向插人真核表达质粒pcDNA3.1(+),并用脂质体法导人NIH3T3及LST细胞.用MitoCapture Mitochondrial Apoptosis Detection Kit试剂盒染色后用流式细胞仪及荧光显微镜检测转染细胞的凋亡情况.扩增并测序分析转染细胞的D-LOOP区突变特点.结果 检测出大肠癌细胞株SW480、LOVO和HT29细胞mtDNA D-LOOP分别有10、9和8个突变位点.转染前后,各组间细胞凋亡无明显变化.转染细胞的核基因组可扩增出目的 基因及Neo基因.4株NIH3T3转染细胞mtDNA D-环区分别检测到9、11、8和4个突变点,并相应有3、4、3和2个多态性变化.结论 转染突变的大肠癌细胞mtDNA后转染细胞的mtDNA均可发生多处的突变位点;通过转染后突变的外源性的mtDNA可以整合到核基因组内;突变的mtDNA转染LST细胞及NIH3T3细胞后,不影响转染细胞的凋亡改变;mtDNA的突变可能通过影响体细胞mtDNA的突变和通过外源性mtDNA在核内的整合从而影响癌基因或抑癌基因的表达异常,从而参与肿瘤的发生发展.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋卫兵	南方医科大学南方医院消化病研究所	15	61	5.0	7.0
2	张振书	南方医科大学南方医院消化病研究所	57	191	8.0	10.0
3	肖冰	南方医科大学南方医院消化病研究所	55	252	10.0	13.0
4	王新颖	南方医科大学南方医院消化病研究所	53	319	11.0	13.0
5	姬宏莉	南方医科大学南方医院消化病研究所	8	35	2.0	5.0