同时沉默Livin基因和MTA1基因的siRNA载体的构建

• 作者: 冯龙 李月白 杨松华 董子明 赵国强 赵继敏 郑红
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 Livin MTA1 载体构建
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 食管癌研究
• 页码范围: 202-205
• 页数: 4页
• 分类号: R735.1
• 字数: 2309字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2008.02.003

摘要

目的:构建同时沉默Livin基因和MTA1基因的小干扰RNA(siRNA)载体.方法:设计Livin和MTA1的siRNA靶序列,合成它们互补的寡核苷酸链,分别退火后重组入pRNAT-U6.2载体,得到pRNAT-U6.2-Livin和pRNAT-U6.2-MTA1.AccⅡ和XhoⅠ酶切pRNAT-U6.2-MTA1,回收475 bp的MTA1 siRNA单元,然后与XhoⅠ和PmeⅠ酶切线形化的pRNAT-U6.2-Livin重组,得到pRNAT-U6.2-Livin-MTA1,后者用脂质体包被转染人食管癌细胞EC9706,采用RT-PCR法分别检测转染细胞Livin和MTA1基因mRNA的表达情况.结果:针对Livin基因和MTA1基因的siRNA的双链寡核苷酸片段分别克隆入pRNAT-U6.2载体,经测序分析插入片段正确.PCR扩增证实MTA1 siRNA单元重组入pRNAT-U6.2-Livin.RT-PCR检测显示,转染pRNAT-U6.2-Livin-MTA1的EC9706细胞Livin基因和MTA1基因mRNA表达水平皆明显降低.结论:同时沉默Livin基因和MTA1基因表达的siRNA载体构建成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯龙	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	13	30	3.0	4.0
2	赵国强	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	245	807	11.0	16.0
3	李月白	郑州大学基础医学院生物化学教研室	65	476	12.0	17.0
4	郑红	郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室	95	298	9.0	11.0
5	董子明	郑州大学基础医学院病理生理学教研室	237	965	14.0	19.0
6	赵继敏	郑州大学基础医学院病理生理学教研室	61	179	7.0	8.0
7	杨松华	郑州大学基础医学院病理生理学教研室	22	69	6.0	7.0