W544F定点突变提高苏云金杆菌Cry1Ac蛋白的稳定性

• 作者: 丁学知 单世平 喻子牛 夏立秋 张友明 王发祥 莫湘涛 赵新民
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Cry1Ac蛋白 定点突变 色氨酸 苯丙氨酸 稳定性
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1999-2002
• 页数: 4页
• 分类号: Q71|Q93
• 字数: 2473字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0251-0790.2008.10.018

摘要

W544是Cry1Ac蛋白上独特于其它Cry类蛋白的一个氨基酸,它与F578和F604一起组成一个"螺旋桨状"的疏水簇,通过疏水相互作用维持蛋白的三维结构稳定.本研究通过定点突变将W544保守地替换为苯丙氨酸,SDS-PAGE分析结果表明其纯化的原毒素对紫外照射、胰蛋白酶处理和室温存贮的稳定性相对于野生Cry1Ac都有一定程度的提高;经原子力显微镜观察,发现W544F产生的晶体两个顶点间的垂直距离比野生型Cry1Ac约长0.6μm,且晶体表面不及野生型光滑;此外,W544F与野生Cry1Ac的杀虫活性相似,但经过紫外光照射9h后,其保留的杀虫活性比野生型高4倍以上.W544F突变较好地解决了Cry1Ac毒素蛋白田间应用不持久的问题,具有重要的应用价值.