缺失α1螺旋的Cry1Ac在大肠杆菌中的表达、纯化和活性分析

• 作者: 刘京国 师光禄 赵晓萌 郭蓓
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: Cry1 Ac α1片段 杀虫活性
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 3248-3250
• 分类号: Q93-33
• 字数: 3133字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2012.06.013

摘要

[目的]对缺失α1螺旋的Cry1Ac在大肠杆菌中的表达、纯化和活性进行分析.[方法]以苏云金芽孢杆菌HD-1中的质粒为模板,扩增缺乏α螺旋的Cry1Ac基因,并将其与pET28a载体连接,构建重组质粒.重组质粒转化并经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达.提取目标蛋白,并涂在棉铃虫饲料表面,检测其杀虫活性.[结果] Cry1Acdelα1基因在大肠杆菌中能正常表达目标蛋白,但该目标蛋白是以包涵体形式存在.生侧结果显示,在相同浓度下,活化的Cry1Ac对棉铃虫的致死率达75％以上,而Cry1Acdelα1只有10％左右.[结论]用大肠杆菌表达的Cry1Acdelα1对棉铃虫基本没有杀虫活性.