人HER2/neu胞外区在毕赤酵母中的表达及鉴定

• 作者: 关铭 孔宁 张婷 徐煌 韩冬 颜炜群
• 来源期刊: 中国老年学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: her2/neu ECD 基因表达 毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 631-633
• 页数: 3页
• 分类号: Q78|Q815
• 字数: 3260字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9202.2008.07.003

摘要

目的 在毕赤酵母中高效表达HER2/neu 胞外区,制备具有与天然HER2/neu相同结构和生物学活性的重组人HER2/neu 胞外区(rhHER2/neu ECD).方法 用RT-PCR法自人Mrna中克隆her2/neu ECD基因,构建真核表达载体pPICZα/her2/neu ECD.经核酸测序确证后,电转化毕赤酵母菌株X-33.用PCR法筛选基因转染后Zeocin抗性阳性的克隆,用SDS-PAGE法筛选高表达HER2/neu ECD工程菌,用Western印迹法鉴定甲醇诱导的培养上清液中的HER2/neu ECD.结果 经RT-PCR法克隆的her2/neu ECD 基因序列与GenBank登录的Cdna序列一致.将her2/neu ECD 基因定向插入pPICZα,构建pPICZα/her2/neu ECD真核表达载体,经电转化获得Zeocin抗性阳性的克隆.SDS-PAGE和Western印迹法分析证实了甲醇诱导的培养基上清中含有HER2/neu ECD,分子量110 kDa.HER2/neu ECD表达量达120 mg/L.结论 克隆her2/neu ECD基因并构建和筛选出高效表达HER2/neu ECD的毕赤酵母工程菌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	颜炜群	吉林大学药学院	112	467	9.0	16.0
2	关铭	吉林大学药学院	19	142	7.0	11.0
3	张婷	吉林大学药学院	123	290	9.0	12.0
4	韩冬	吉林大学药学院	27	257	9.0	15.0
5	徐煌	嘉兴学院医学院	17	25	3.0	4.0
6	孔宁	吉林大学药学院	17	31	2.0	3.0