hTERT-逆转录病毒载体构建及其介导的脐血间质干细胞基因转移研究

• 作者: 刘瑞敏 李克 邢莹 韩雪飞
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 间质干细胞 脐血 人端粒酶逆转录酶 逆转录病毒载体
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 361-364
• 页数: 4页
• 分类号: R392.12
• 字数: 2765字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2008.02.033

摘要

目的:构建hTERT-逆转录病毒载体,向脐血间质干细胞(MSCs)中导入hTERT基因,观察该基因对细胞端粒酶活性的影响,能否延长细胞的寿命以及转基因细胞的分化能力.方法:PCR法扩增出hTERT全部片段,定向克隆入pLNCX2载体.将病毒质粒导入包装细胞内,筛选阳性产毒细胞,测定病毒滴度.取病毒上清感染脐血MSCs,筛选转基因细胞.检测转染前后hTERT在mRNA水平的表达,端粒酶活性的变化,hTERT转入后对细胞增殖的影响.用5-氮杂胞苷将转基因细胞向心肌方向诱导,检测心肌特异抗体的表达.结果:用BglⅡ和NotI双酶切构建质粒,证明PLNCX2-hTERT构建成功,转基因细胞的hTERT基因在mRNA水平得到表达,细胞端粒酶阳性.生长曲线显示转基因细胞增殖速度快于未转染细胞.向心肌细胞诱导后,心肌特异性抗体α-sarcomericactin和connexin-43均有表达.结论:在逆转录病毒介导下,外源性hTERT基因转入脐血MSCs后得到表达,激活细胞端粒酶的活性,有效延长了细胞的寿命,不影响其分化功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邢莹	郑州大学医学院干细胞研究中心	73	258	9.0	11.0
2	李克	郑州大学医学院干细胞研究中心	29	102	6.0	9.0
3	韩雪飞	郑州大学医学院干细胞研究中心	49	183	7.0	10.0