联合双基因表达载体的构建及其拟南芥转化

• 作者: 段瑞军 符少萍 胡新文 郭建春 钟胜
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: CBF3冷诱导表达载体 CBF3和AtGolS3双基因表达载体 拟南芥转化
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 52-54
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2921字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.01.047

摘要

[目的]为了研究CBF3冷诱导转录因子和细胞渗透调节物质AtGloS3在抗寒中的相互作用,寻找理想的抗寒转基因方式.[方法]根据GenBank中拟南芥(Arabidopsis thaliana)基因组序列设计引物,通过PCR反应克隆包括CBF3(C-repeat Binding Factor3)基因以及基因上游启动子的DNA序列:CP-CBF3,共2075 bp.CP是CBF3基因的启动子,受低温诱导.用EcoRI和BamHI双酶切CP-CBF3并置于植物表达载体pCAMBIA1300中,构建CBF3基因冷诱导表达载体pCA-CP-CBF3.然后将带有组成型启动子的肌醇半乳糖苷酶基因AtGloS3合并于pCA-CP-CBF3中,构建双基因植物表达载体pCA-CP-CBF3-35S-AtGloS3.用真空抽滤虑法将这两个表达载体转化到拟南芥中,并用潮霉素筛选出转基因植物苗.[结果]CBF3和AtGloS3基因均来自拟南芥,而CBF3不存在内含子,AtGloS3基因存在内含子,故以CB-1、CB-2为引物的非转基因植物中也能得到带,而以AT-1、AT-2为引物的非转基因植物不能得到带.[结论]该研究中pCA-CP-CBF3是1个对照,实验的后续工作需进一步进行.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钟胜	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	2	4	1.0	2.0
2	段瑞军	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	33	158	6.0	11.0
3	郭建春	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	89	815	16.0	24.0
4	胡新文	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	32	248	9.0	15.0
5	符少萍	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	44	336	9.0	17.0