从活性污泥中提取微生物总DNA的方法比较

• 作者: 伍阳 段莎丽 谢勇丽 谢睛 邓仕槐 龙用波
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 物理学
• 关键词: 畜禽废水 活性污泥 DNA提取 PCR扩增
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 4452-4454
• 页数: 3页
• 分类号: O781
• 字数: 4073字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.11.037

摘要

[目的]探索适宜的畜禽废水中活性污泥微生物总DNA提取的方法.[方法]采用2种方法提取畜禽废水中活性污泥微生物总DNA,即"提取缓冲液+蛋白酶K+SDS"提取法以及"溶菌酶-SDS-蛋白酶"提取法.通过对这2种方法进行比较,以确定最佳试验方案.[结果]紫外分光光度法分析表明,"提取缓冲液+蛋白酶K+SDS"提取法所得的OD260/OD280大于1.81.电泳结果显示,"提取缓冲液+蛋白酶K+SDS"提取法提取DNA亮度高,有大片断DNA的存在且拖带较少,条带集中,能成功进行16S rDNA的PCR扩增;通过PCR扩增所得的DNA的纯度检测结果显示,扩增出了条带分子约为1 500 bp的特异性条带."溶菌酶-SDS蜃白酶"提取法所提取的DNA没有得到较好的效果,点样孔较亮则可能存在一定的蛋白质残留,或其他杂质等,通过PCR扩增没有扩出特异性条带.[结论]"提取缓冲液+蛋白酶K+SDS"提取法为畜禽废水中微生物群落在分子水平上的研究提供了1种简便、可靠的DNA提取方法,为分析畜禽废水中细菌多样性提供了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邓仕槐	四川农业大学农业环境工程省重点实验室	68	778	14.0	25.0
2	伍阳	四川农业大学农业环境工程省重点实验室	4	44	2.0	4.0
3	龙用波	四川农业大学农业环境工程省重点实验室	4	59	3.0	4.0
4	谢勇丽	四川农业大学农业环境工程省重点实验室	4	34	2.0	4.0
5	段莎丽	四川农业大学农业环境工程省重点实验室	4	14	2.0	3.0
6	谢睛	四川农业大学农业环境工程省重点实验室	1	9	1.0	1.0