重组牛γ-干扰素单克隆抗体的研制

• 作者: 孟闯 张成全 徐正中 杨卫冲 潘志明 焦新安 牛中伟 陈祥 黄金林
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 重组牛γ干扰素 原核表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 病毒
• 页码范围: 15-19
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2854字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2009.04.004

摘要

为制备针对重组牛γ-干扰素(rBoIFN-γ)的单克隆抗体(mAb),以纯化的原核表达融合蛋白rHis-BOIFN-γ为免疫原,用纯化的rGST-BoIFN-γ为筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术,研制抗rBoIFN-γ的mAb.结果获得13株稳定分泌抗BoIFN-γ mAb的细胞株,命名为1C12、1F7、1G5、3E6、4D5、5E11、5G4、6F8、6G6、7E9、8D3、8F8和9G11.腹水的效价除单抗9G11外,其余效价都在1:80000以上;除5G4 mAb亚类为IgG2b外,其余均为IgG1.Dot-ELISA结果表明,所得单抗只与融合蛋白rHis-BoIFN-γ和rGST-BoIFN-γ反应,而不与其它重组细胞因子和对照细菌反应,显示其良好的特异性.Western blot显示所获单抗能与相应的融合蛋白发生反应,出现特异性务带.同时所获单抗均能与牛IFN-γ标准品反应.13株单抗均为针对rBoIFN-γ的特异性mAb,为进一步研究rBoIFN-γmAb在牛的免疫调控、牛疫病的致病机制及其诊断中的应用奠定基础.