通过一种新方法使T7基因I置换araBAD基因簇

• 作者: 周长林 戴红梅 方宏清 李树龙 沈林 陈惠鹏
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 大肠杆菌 T7基因I araBAD基因簇 归巢内切酶 L-阿拉伯糖
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 643-646
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3417字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2009.05.013

摘要

目的:用T7 RNA聚合酶基因T17基因I置换大肠杆菌基因组中的araBAD基因簇.方法:通过分析大肠杆菌基因组中araBAD基因序列,设计两侧同源臂,构建高拷贝数的打靶质粒,并且在这个质粒上的打靶片段两侧各加上一个归巢内切酶位点;将辅助质粒和打靶质粒同时转化到宿主体内,在L-阿拉伯糖的诱导下表达归巢内切酶和Red重组酶,实现体内重组,使T7基因I置换araBAD基因簇.结果:在4株不同的大肠杆菌中用T7基因I置换了araBAD基因簇.结论:成功地将T7基因,整合到araBAD基因位置,为构建Para-PT7表达系统奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方宏清	军事医学科学院生物工程研究所	42	245	8.0	13.0
2	陈惠鹏	军事医学科学院生物工程研究所	143	885	15.0	23.0
3	周长林	中国药科大学生命科学与技术学院	80	451	12.0	18.0
4	戴红梅	军事医学科学院生物工程研究所	19	88	6.0	8.0
5	李树龙	军事医学科学院生物工程研究所	7	35	3.0	5.0
6	沈林	中国药科大学生命科学与技术学院	1	3	1.0	1.0