巨噬细胞趋化检测方法的建立及皮质酮对其趋化功能的影响

• 作者: 严军 刘庆 杨天德 杨策 王海燕 蒋建新 钟河江 黄苏娜
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 趋化检测 巨噬细胞 皮质酮
• 年，卷（期）: 2009,（15）
• 所属期刊栏目: 麻醉专题
• 页码范围: 1876-1878,1881
• 页数: 4页
• 分类号: R365.446
• 字数: 3705字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2009.15.011

摘要

目的 建立改良Boyden趋化小室(Boyden chamber)法检测巨噬细胞趋化功能的方法,探讨皮质酮对大鼠腹腔巨噬细胞趋化功能的影响.方法 分离成年Sprague-Dawley(SD)大鼠腹腔巨噬细胞.应用48孔Boyden chamber趋化板检测趋化功能.下室加入27μL的10nM FMLP作为趋化剂或含1%牛血清清蛋白的RPMI-1640作为阴性对照,将50μL不同细胞密度的大鼠腹腔巨噬细胞悬液(3、6、12×106/mL)置于上室以确定最适细胞密度,将趋化装置置于5%CO2、37℃细胞培养箱内孵育2、3h以确定最适孵育时间.同时,以0、10、50、1 000ng/mL皮质酮处理大鼠腹腔巨噬细胞,应用Boyden chamber法检测巨噬细胞趋化功能.结果 巨噬细胞对10nM FMLP趋化剂呈细胞密度依赖性增加,上室巨噬细胞密度为6×106/mL时为最适细胞密度,并且最适孵育时间为3h.低浓度皮质酮(10、50ng/mL)处理大鼠腹腔巨噬细胞其趋化指数显著高于对照组(P＜0.01),而高浓度皮质酮(1 000ng/mL)处理后巨噬细胞趋化指数与对照组相比差异不明显.结论 成功建立了改良Boyden chamber法检测巨噬细胞趋化功能方法,皮质酮可呈剂量依赖性地影响巨噬细胞趋化功能,在无免疫刺激状态下,低浓度皮质酮能增强巨噬细胞趋化功能.