以P型职PRSV-VPg为模板多位点突变获得W型PRSV-VPg的研究

• 作者: 周鹏 沈文涛 肖旭倩 胡正龙 言普
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: PRSV-VPg 基因改造 长引物延伸 套叠PCR
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 104-108
• 页数: 5页
• 分类号: Q781
• 字数: 3137字
• 语种: 中文

摘要

以P型PRSV-VPg(Papaya Ringspot Virus,VPg gene)基因为模板利用高保真酶通过两对引物(突变4个位点),PCR扩增获得一条276 bp和一条141 bp的两个小片段.以此为基础,利用长引物延伸和套叠PCR的方法,定点突变剩余5个位点,最后拼接获得W型PRSV-VPg基因.结果表明通过上述方案可以成功改造P型PRSV-VPg基因,获得与W型朋PRSV-VPg同源的目的基因,成功率为100%.该技术可以绕开传统的通过寻找毒源进行RT-PCR方法和人工合成方法获得病毒基因,其技术操作简单,且节约时间和成本,并在人工合成基因、多位点基因定点突变等方面具有很好的借鉴作用和应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周鹏		129	1451	21.0	32.0
5	沈文涛	中国热带农业科学院热带作物生物技术研究所	66	524	11.0	20.0
6	言普	中国热带农业科学院热带作物生物技术研究所	33	132	5.0	9.0
7	胡正龙		2	6	1.0	2.0
11	肖旭倩		3	6	1.0	2.0