慢病毒为载体的siRNA抑制肝星状细胞TIMP-1的表达

• 作者: 丛敏 刘天会 吴晓宁 唐淑珍 尤红 杨爱婷 王萍 白艳锋 贾继东 马红
• 来源期刊: 首都医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 小干扰RNA 金属蛋白酶组织抑制因子-1 慢病毒 肝星状细胞
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 肝纤维化基础研究
• 页码范围: 309-312
• 页数: 4页
• 分类号: R575
• 字数: 2562字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7795.2009.03.011

摘要

目的 观察以慢病毒为载体,用含有针对大鼠金属蛋白酶组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)、具有较强抑制作用的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)感染大鼠肝星状细胞系HSC-T6后对TIMP-1表达的抑制作用.方法 针对大鼠TIMP-1 mRNA基因序列挑选2个不同短片段(nt161～181和nt 445～463),在体外构建为短发夹siRNA1、siRNA2表达载体后,将其包装为重组Lenti/siRNA1-TIMP-1/GFP和Lenti/siRNA2-TIMP-1/GFP,同时包装阴性对照Lenti/GFP(空载体组),并以滴度MOI=10感染大鼠肝星状细胞系HSC-T6,感染后3 d,用流式细胞仪及荧光显微镜检测病毒的感染效率.分别在感染后7、9 d用Western blotting方法 检测TIMP-1蛋白表达情况.结果 感染HSC-T6后细胞形态和增生速度未发生明显变化.流式细胞仪及荧光显微镜检查证实感染效率分别为:空载体组 68.23%,siRNA1感染组57.93%,siRNA2感染组 51.2%,与正常细胞相比,感染后7 d和9 d,siRNA1、siRNA2感染组TIMP-1蛋白表达均有所下降,但只有siRNA1感染组在感染后9 d能显著抑制TIMP-1表达,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 构建的重组Lenti/siRNA-TIMP-1/GFP可短期有效抑制大鼠肝星状细胞系HSC-T6 TIMP-1蛋白表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王萍	首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心	223	1369	18.0	27.0
2	唐淑珍	首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心	14	85	5.0	8.0
3	贾继东	首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心	357	3465	28.0	40.0
4	丛敏	首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心	30	78	5.0	6.0
5	刘天会	首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心	31	89	5.0	7.0
6	马红	首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心	92	813	16.0	23.0
7	吴晓宁	首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心	15	161	6.0	12.0
8	白艳锋	首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心	8	97	3.0	8.0
9	杨爱婷	首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心	15	82	3.0	9.0