链孢粘帚霉寄生核盘菌菌核差异表达基因的筛选及分析

• 作者: 张拥华 李世东 郭荣君 高会兰
• 来源期刊: 中国生物防治
• 学科: 农学
• 关键词: 链孢粘帚霉 菌寄生 核盘菌菌核 抑制消减杂交 差异表达基因
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 48-54
• 页数: 7页
• 分类号: S476.8|Q785/6
• 字数: 3973字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1005-9261.2009.01.010

摘要

为克隆和研究链孢粘帚霉Gliocladium catenulatum寄生核盘菌菌核的相关基因,应用抑制消减杂交技术构建了cDNA消减文库并进行了筛选.通过PCR技术从文库中共筛选到1315个阳性克隆,克隆中插入片段大小主要集中于300～600bp之间.随机挑取120个克隆,经测序和同源性分析,获得60条有效序列,其中部分序列所编码的血红素加氧酶、核糖体蛋白L11、细胞色素P450及热激蛋白等均参与机体对胁迫条件的应答反应.11条序列在NCBI数据库中未找到显著匹配的序列,可能为新基因片段.分别将寄生于核盘菌菌核上的粘帚霉cDNA和粘帚霉与核盘菌纯培养的cDNA混合物经Ras I酶切后进行标记作为探针,利用反向Northern杂交技术验证了所选取的25条序列全部为差异表达基因片段.