多响应曲面优化-毛细管电泳-激光诱导荧光快速检测食源性致病菌

• 作者: 何成艳 何玲 李永新 渠凌丽 郑波 黎源倩
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 化学
• 关键词: 多响应曲面优化 毛细管电泳 激光诱导荧光检测 食源性致病菌 多重PCR
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1121-1127
• 页数: 7页
• 分类号: O658
• 字数: 5477字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0251-0790.2009.06.012

摘要

建立了食品中常见致病菌:沙门菌的invA基因、大肠杆菌O157:H7的rfb O157基因、志贺菌的自ipaH基因及副溶血性弧菌Vpara(16S-23S rDNA IGS)基因的多重PCR产物-毛细管电泳快速检测方法.根据沙门菌、大肠杆菌O157:H7、志贺菌及副溶血性弧菌的特异性基因保守序列设计出多重PCR引物,优化PCR扩增反应体系.采用多响应曲面法优化毛细管电泳的分离条件,以含有DNA荧光染料SYBR Green I的1.0%甲基纤维素为筛分介质,通过毛细管电泳-激光诱导荧光同时检测4种常见致病菌的PCR扩增产物.在优化的多重PCR反应体系和毛细管筛分电泳条件下,此方法可以同时检测出沙门菌的invA基因、大肠杆菌O157:H7的rfb O157基因、志贺菌的ipa H基因及副溶血性弧菌Vara(16S-23S rDNA IGS)基因的多重PCR扩增产物,25 min内即可完成检测.迁移时间的日内相对标准偏差为0.92%～1.58%.通过多响应曲面的优化,有效改善了毛细管电泳对DNA分子的分离能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑波	四川大学华西公共卫生学院卫生检验教研室	45	388	13.0	17.0
2	何成艳	四川大学华西公共卫生学院卫生检验教研室	4	83	4.0	4.0
3	黎源倩	四川大学华西公共卫生学院卫生检验教研室	79	1286	21.0	30.0
4	何玲	四川大学华西公共卫生学院卫生检验教研室	25	67	5.0	8.0
5	李永新	四川大学华西公共卫生学院卫生检验教研室	29	318	9.0	17.0
6	渠凌丽	四川大学华西公共卫生学院卫生检验教研室	5	37	4.0	5.0