VEGFR-3胞外区基因真核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 伍治平 刘馨 周永春 王熙才 谷玉兰 金从国 陈艳
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: VEGFR-3 淋巴生成 真核表达
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 40-43
• 页数: 4页
• 分类号: R73-75
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2009.01.012

摘要

目的 构建VEGFR-3胞外区基因真核表达载体pcDNA3.1-VR-3,并在体外进行表达和鉴定.方法 采用RT-PCR技术,扩增C57BL/6小鼠胚胎VEGFR-3胞外区cDNA片段,通过基因重组技术将其插入到真核表达载体pcDNA3.1,构建重组质粒pcDNA3.1-VR-3.经限制性酶切鉴定和DNA序列测定结果证实后,将重组质粒经脂质体法转染COS-7细胞,Western blotting检测其蛋白表达.结果 克隆了C57BL/6小鼠胚胎VEGFR-3胞外区cDNA片段,并构建了真核表达载体pcDNA3.1-VR-3,Western blot证实目的基因可在COS-7细胞中表达.结论 构建的真核表达载体pcDNA3.1-VR-3,可在真核细胞内正确表达,这为进一步的动物实验奠定了基础.