白介素-18基因修饰人脑胶质瘤U87/hIL-18细胞的建立

• 作者: 徐敏敏 戴学军 林健 王伟民 王建业 袁振华 赵刚
• 来源期刊: 中国微侵袭神经外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经胶质瘤 白细胞介素18 质粒 U87细胞
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 29-32
• 页数: 4页
• 分类号: R730.264
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人白介素18(hIL-18)基困真核表达载体质粒,建立hIL-18基因修饰并呈稳定表达的人脑胶质瘤U87/hIL-18细胞.方法 从人淋巴细胞cDNA文库钓取hIL-18基因后行PCR扩增,利用peDNA3.1(+)质粒为载体,构建hIL-18真核表达质粒pcDNA 3.1/hIL-18.将构建的重组质粒转染人胶质瘤细胞U87,采用G418筛选单克隆细胞株,ELISA检测培养上清中的hIL-18蛋白含量,提取细胞RNA,RT-PCR方法检测hIL-18基因在U87/hIL-18细胞中的表达.结果 所得hIL-18 cDNA序列与Gene Bank比对一致,构建的质粒经PCR、酶切及测序鉴定正确.质粒转染U87细胞后.经加压筛选获得hIL-18基因稳定、高效表达的U87/hIL-18单克隆细胞株,细胞堵养72 h的上清中,hIL-18蛋白含量达131.2 pg/ml,且RT-PCR结果显示细胞中hIL-18基因表达呈阳性.结论 成功构建hIL-18真核表达质粒pcDNA3.I/hIL-18,并建立U87/hIL-18单克隆细胞株,为IL-18基因修饰的胶质瘤疫苗研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵刚	中国人民解放军广州军区广州总医院神经外科	53	189	8.0	11.0
2	林健	中国人民解放军广州军区广州总医院神经外科	20	38	4.0	5.0
3	袁振华		2	3	1.0	1.0
4	王伟民	中国人民解放军广州军区广州总医院神经外科	41	194	7.0	12.0
5	王建业	中国人民解放军广州军区广州总医院神经外科	4	4	1.0	2.0
6	戴学军	中国人民解放军广州军区广州总医院神经外科	6	88	3.0	6.0
7	徐敏敏		2	1	1.0	1.0