抗AAV2单克隆抗体的制备及特性研究

• 作者: 吴小兵 田文洪 董小岩 袁振华 谭淑萍
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 2型腺相关病毒 单克隆抗体 中和抗体 构象表位
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 267-273
• 页数: 7页
• 分类号: Q78|R373
• 语种: 中文

摘要

以纯化的重组AAV2病毒颗粒为抗原免疫小鼠,获得7株稳定分泌抗AAV2衣壳蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,其中B10和G4两株单克隆抗体具有中和活性,抗体亚型分别为IgG1和IgG2a型,对这两株单克隆抗体与rAAV病毒结合的特性进行了研究.单克隆抗体B10和G4对rAAV2病毒颗粒的结合均具有良好的血清型特异性,并且这种特异结合作用不被肝素阻断.这两株抗体都不阻断AAV2病毒与敏感细胞的结合,提示它们与病毒颗粒的结合位点都不处于AAV2病毒与主要受体结合的部位内.Western blotting检测结果显示,B10与AAV2的三种衣壳蛋白VP1、VP2和VP3均能结合,而G4不能与AAV2的这三种衣壳蛋白结合.这说明B10与AAV2结合的位点位于衣壳蛋白VP1、VP2和VP3的重叠部分处并且可能是线性表位,而G4则可能是针对AAV2病毒颗粒构象表位的抗体.这两种结合特性不同的单克隆抗体为研究AAV2病毒颗粒的表面特性和感染特性提供有用的工具.