利用外源基因侧翼序列扩增筛选番茄纯合转基因植株

• 作者: 崔艳红 张忠华 李颖 杜永臣 贾芝琪 黄三文
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 转基因番茄 侧翼序列扩增 纯合植株筛选
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 820-824
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 3001字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2009.05.014

摘要

传统的纯化外源基因的方法主要是通过多代自交,该方法耗时长,效率低.对转基因材料中外源基因T-DNA区域插入位点两翼序列的分析和扩增,是在转基因后代中筛选纯合转基因植株的新方法.首先,利用酶切连接接头的PCR方法,在番茄(Lycopersicon esculentum)转基因植株中扩增外源基因Avr3a的两翼序列并测序;然后通过该序列设计的引物在转基因植株中验证,得到的两翼序列通过与SGN数据库比对分析,结果发现,外源基因的插入位点有40 bp的碱基缺失;最后利用侧翼序列和边界序列设计的引物.在转基因T1代植株中筛选出纯合单株,这些植株在T2代进行验证确实为纯合单株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李颖	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	76	602	13.0	20.0
2	黄三文	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	51	738	14.0	26.0
3	杜永臣	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	72	1152	19.0	31.0
4	贾芝琪	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	4	43	3.0	4.0
5	张忠华	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	7	108	6.0	7.0
6	崔艳红	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	4	32	2.0	4.0