表达GFP和gpt基因的重组CVI988病毒的构建

• 作者: 周斌 曹瑞兵 葛菲菲 邱亚峰 陈溥言 马志永
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 马立克氏病病毒(MDV) 转移载体 绿色荧光蛋白 转染 重组病毒
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 183-188
• 页数: 6页
• 分类号: S188
• 字数: 5441字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2009.02.001

摘要

以马立克氏病病毒(MDV)CVI988株基因组为模板,利用PCR技术扩增出约2.7和3.0kb的基因片段,将上述片段同时插入pUC19中,获得约5.5 kb MDV同源重组臂;以该基因片段的US2区的BglⅡ为插入位点,分别插入基因表达盒CMV-gpt-Plouy A和CMV-gfplyA,构建转移载体pUS-gpt-GFP,将该载体瞬时转染CHO细胞,在荧光显微镜下,可以观察到绿色荧光蛋白的表达;将该转移载体转染已用MDv VB1998株感染的次代CEF细胞.利用MX-HAT培养基筛选重组病毒,并用荧光显微镜挑选表达绿色荧光蛋白的蚀斑,结果获得重组病毒rMDVgptGFP.通过PCR检测和病毒生长测定,证明重组病毒获得纯化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈溥言	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	269	2875	28.0	40.0
2	周斌	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	62	792	17.0	26.0
3	曹瑞兵	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	71	897	19.0	28.0
4	葛菲菲		53	203	8.0	12.0
5	马志永	中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生研究室	26	137	7.0	10.0
6	邱亚峰	中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生研究室	11	43	3.0	6.0