重复水高压注射介导hHGF表达载体在小鼠体内的持续高效表达

• 作者: 朱传龙 李宜 李毓雯 聂青和 高人焘
• 来源期刊: 实用肝脏病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 促肝细胞生长因子 肝脏 水高压注射 基因表达 小鼠
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 81-83,123
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 3168字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5069.2009.02.001

摘要

目的 构建hHGF表达载体并通过水高压注射法研究hHGF在小鼠体内的持续表达.方法 从慢性乙型肝炎患者肝组织提取总RNA,RT-PCR扩增出hHGF基因的cDNA片段,将目的 片断克隆至pMD18-T载体,酶切和测序鉴定,然后将目的片断酶切回收后插入pcDNA3.1质粒,构建真核表达载体pcDNA-hHGF,通过重复水高压注射法将pcDNA-hHGF导入小鼠肝脏,并在首次水高压注射后第0、3、6、9、12、15、18和21天分别收集小鼠血清和肝组织,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测hHGF在小鼠体内的表达情况.结果 扩增出了长约2187bp的基因片段,并将其克隆至pMD18-T载体,酶切和测序鉴定无误;将pMD-hHGF中hHGF基因亚克隆至pcDNA3.0载体,酶切鉴定无误;首次水高压注射后不同时间检测外周血和肝脏均有hHGF的高水平表达.结论 成功构建了hHGF真核表达载体pCMV-hHGF,重复水高压注射法可将该基因导入小鼠肝脏并获得持续高效的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李宜	安徽医科大学附属安徽省立医院感染病科	16	71	5.0	7.0
2	朱传龙	安徽医科大学附属安徽省立医院感染病科	16	112	6.0	10.0
3	李毓雯	安徽医科大学附属安徽省立医院儿科	3	4	1.0	2.0
4	高人焘	安徽医科大学附属安徽省立医院感染病科	23	153	7.0	11.0
5	聂青和	西安市第四军医大学唐都医院传染病科、全军感染病诊疗中心	4	15	2.0	3.0