人载脂蛋白AⅠ重组腺病毒载体的构建及其在小鼠体内的表达

• 作者: 吴满平 李悦 董继斌
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 分子生物学 载脂蛋白AⅠ 腺病毒载体 基因表达 脂多糖
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 201-204
• 页数: 4页
• 分类号: Q7
• 字数: 3741字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3949.2008.03.009

摘要

目的 构建人载脂蛋白AⅠ基因的重组腺病毒载体,探讨人载脂蛋白AⅠ在小鼠体内的表达,建立人载脂蛋白AⅠ过表达小鼠模型.方法 采用基因工程技术从重组质粒pDNR-LIB-apoAⅠ-PA获得人载脂蛋白AⅠ基因,插入穿梭质粒pshuttle CMV 后,在细菌内与pAdEasy-1进行同源重组,经脂质体转染HEK293细胞,在细胞内包装获得腺病毒颗粒AdV-AⅠ,并进行大量扩增和纯化.纯化的腺病毒经尾静脉注射入BALB/c小鼠体内,通过双向琼脂免疫扩散反应、免疫比浊法及免疫印迹法检测人载脂蛋白AⅠ在小鼠体内的表达.结果 成功构建了重组腺病毒载体,纯化后的病毒滴度达4.0×1013 pfu/L.重组腺病毒载体能在小鼠体内高表达人载脂蛋白AⅠ,且在注射1天后表达高达740±110 mg/L.结论 成功构建了重组腺病毒载体, 并能介导外源基因人载脂蛋白AⅠ在小鼠体内的表达, 建立了人载脂蛋白AⅠ过表达小鼠模型,为进一步研究载脂蛋白AⅠ的抗内毒素功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴满平	复旦大学药学院生物化学与分子生物学教研室	16	147	7.0	12.0
2	李悦	复旦大学药学院生物化学与分子生物学教研室	7	55	4.0	7.0
3	董继斌	复旦大学药学院生物化学与分子生物学教研室	8	34	2.0	5.0