产毒型O139群霍乱弧菌实时荧光双重TaqMan聚合酶链反应检测体系的临床应用前研究

• 作者: 吴丽娟 杨辉 胡继红 蔡剑平 龚成
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 产毒型O139群霍乱弧菌 实时荧光TaqMan聚合酶链式反应 霍乱肠毒素
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 737-739
• 页数: 3页
• 分类号: R516.5
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨产毒型O139群霍乱弧菌实时荧光双重TaqMan聚合酶链式反应检测体系对临床模拟标本检测的意义,为该检测体系的临床应用提供可靠的技术依据.方法:将O139群霍乱弧菌灭活菌株悬液[1.0×1010 cfu(菌落形成单位)/ml]连续10倍稀释后与健康成人新鲜粪便混匀,制备成5.0×1010～5.0×108 cfu/g梯度浓度的模拟带菌者粪便标本并提取DNA,用以评价我们自行建立的产毒型O139群霍乱弧菌实时荧光双重TaqMan聚合酶链式反应检测体系对临床模拟标本检测的敏感度、特异性和稳定性.结果:实时荧光双重TaqMan聚合酶链式反应快速检测体系对O139群霍乱弧菌的模拟带菌者粪便标本的检测敏感度为1.0×103 cfu每反应体系(5.0×104 cfu/g),其线性检测范围是1.0×103～1.0×107 cfu每反应体系;在稳定性评价中,对1.0×103～1.0×107 cfu模拟带菌者粪便标本DNA进行3次重复检测的结果显示,ctxA基因扩增反应Ct值的变异系数为1.40%～4.10%,rfb-O139基因扩增反应Ct值的变异系数为0.04%～2.08%;在特异性评价中,3名健康成人新鲜粪便标本的阴性对照均未见特异性扩增曲线.结论:我们建立的产毒型O139群霍乱弧菌实时荧光双重TaqMan聚合酶链式反应检测体系可用于O139群霍乱弧菌临床粪便标本的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡继红		8	14	1.0	3.0
2	蔡剑平		10	45	4.0	6.0
3	杨辉		2	0	0.0	0.0
4	吴丽娟		2	0	0.0	0.0
5	龚成		2	0	0.0	0.0