鸭圆环病毒基因组序列分析及其C1截短基因的原核表达

• 作者: 傅光华 彭春香 施少华 杨维星 程龙飞 陈珍 陈红梅 黄瑜
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭圆环病毒 基因组 序列分析 C1截短基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1269-1273
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

本试验参照GenBank登录的鸭圆环病毒(DuCV)基因组序列,设计2对DuCV特异性引物,运用PCR方法从病死番鸭法氏囊中分段扩增出DuCV LJ07株基因组,将扩增片段分别克隆获得重组质粒,测序后得到全长为1 995nt的DuCV LJ07株全基因组序列,与GenBank登录的DuCV基因组序列的同源性迭83.6%～96.5%.经基因结构分析发现,DuCV LJ07株的基因组有6个开放阅读框(ORF),其中V1、C1是2个最主要的ORF,分别编码Rep蛋白和Cap蛋白;在V1和C1的5'起始端之间有与启动滚环复制有关的一茎环结构和2个正向重复序列.本试验同时还构建了去除核定位信号的C1截短基因的原核表达载体,诱导表达后经SDS-PAGE和Western-blotting分析表明C1截短基因已成功地在大肠杆菌中表达出Cap截短蛋白,为建立DuCV抗体血清学检测方法和开展DuCV感染的血清学调查奠定了基础.