鸡γ-干扰素基因(ChIFN-γ)的瞬时表达及其抗病毒活性检测

• 作者: 刘胜旺 吴东来 张文龙 步志高 殷喆 王君伟 陈伟业
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡γ-干扰素基因 瞬时表达 抗病毒活性检测
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 954-959
• 页数: 6页
• 分类号: S188
• 字数: 4207字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2009.06.003

摘要

采用PCR技术从质粒pET-ChIFN-γ中扩增得到鸡(Gallus gallus)γ-干扰素(chicken interferon gamma,ChIFN-γ)基因,将其亚克隆到真核表达载体pCAGGS中.将鉴定正确的克隆命名为pCAGGS-ChIFN-γ,体外转染鸡胚成纤维(CEF)细胞,24 h后经间接免疫荧光(IFA)和免疫印迹(Western blot)检测,表达蛋白具有良好的免疫原性.然后利用表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组水疱口炎病毒(VSV*GFP)在CEF细胞上检测表达的ChIFN-γ抗病毒活性(AVA),经检测其抗病毒活性为2×10~3AU/mL,并且其活性可被抗鸡IFN-γ的多克隆抗体阻断.