棉铃虫信息素结合蛋白2 cDNA的克隆、表达与组织特异性表达

• 作者: 张帅 张永军 苏宏华 郭予元 高希武
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 棉铃虫 信息素结合蛋白 原核表达 纯化 表达谱
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 2359-2365
• 页数: 7页
• 分类号: S4
• 语种: 中文

摘要

[目的]克隆、分析和原核表达编码棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)信息素结合蛋白HarmPBP2的cDNA,并纯化得到HarmPBP2蛋白.[方法]以棉铃虫触角为材料,通过RT-PCR技术以获得编码中棉铃虫信息素结合蛋白HarmPBP2基因成熟蛋白开放阅读框序列,使用半定量RT-PCR对表达谱进行研究,并在使用pGEX-4T-1 表达载体在BL21(DE3)系统中进行原核表达,使用GSTrap FF预装柱进行纯化并切去标签.[结果]克隆了命名为HarmPBP2(GenBank登录号:EU647241)的棉铃虫信息素结合蛋白基因,该序列全长457 bp,编码149个氨基酸残基,前端是一段25个氨基酸长的信号肤,推测蛋白具有昆虫信息素结合蛋白典型的6个保守的半胱氨酸残基的特征.棉铃虫HarmPBP2在雌雄成虫的触角、足和翅中都有表达,另外在雌虫下颚须也有表达.雌雄组织表达量顺序相同,触角中表达量最高,翅中次之,足中最少.雌虫组织中表达量高于雄虫.构建的原核表达载体pGEX/HarmPBP2,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功地表达出一个分子量约为40 kD的融合蛋白,经亲和层析纯化与酶切得到去标签的HarmPBP2蛋白.[结论]克隆、分析和表达了棉铃虫信息素结合蛋白HarmPBP2的cDNA序列,并对其进行纯化,为进一步研究其分子结构和功能奠定了基础,同时对其表达谱进行了研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭予元	中国农业科学研究院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	104	3382	36.0	54.0
2	高希武	中国农业大学农学与生物技术学院	201	3640	32.0	49.0
3	张帅	中国农业科学研究院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	40	249	9.0	13.0
7	张永军	中国农业科学研究院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	73	1431	23.0	35.0
8	苏宏华	中国农业科学研究院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	8	107	5.0	8.0