重组巴氏杆菌透明质酸合成酶的克隆、表达及活性鉴定

• 作者: 何书英 彭辰 葛昊 高向东
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: rPmHAs 表达 纯化 活性鉴定
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 549-552
• 页数: 4页
• 分类号: Q966
• 字数: 2483字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5048.2009.06.016

摘要

目的:构建重组巴氏杆菌透明质酸合成酶(rPmHAS)原核表达系统,获取高纯度、有活性的rPmHAS.方法:利用大肠杆菌BL-21 pE,pET32a(+)表达重组蛋白,镍亲和柱纯化,夹心竞争EUSA法检测酶活性.结果:western blotting检测显示特异性条带,重组蛋白正确表达,镍亲和柱纯化后得到重组蛋白的纯度可达90%.结论:成功构建了pET2a(+)/rPmHAS重组质粒并实现了目的蛋白高效可溶表达,为PmHAs性质相关研究及单一相对分子质量寡聚透明质酸的合成奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高向东	中国药科大学生命科学与技术学院	188	1604	21.0	30.0
2	何书英	中国药科大学生命科学与技术学院	35	181	8.0	12.0
3	葛昊	中国药科大学生命科学与技术学院	2	1	1.0	1.0
4	彭辰	中国药科大学生命科学与技术学院	1	1	1.0	1.0