脱氢奎尼酸合成酶基因aroB在大肠杆菌中的克隆和表达

• 作者: 刘云 吴建新 常会波 徐琪寿
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: 脱氢奎尼酸合成酶 aroB基因 大肠杆菌 基因表达
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 326-328,332
• 页数: 4页
• 分类号: Q785
• 字数: 3162字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2004.04.008

摘要

目的: 克隆表达大肠杆菌脱氢奎尼酸合成酶基因aroB,并测定其生物学活性.方法: 根据大肠杆菌中aroB基因的序列设计了一对引物,利用PCR技术扩增得到aroB基因,将其克隆入pGEM-Teasy载体中,以双脱氧法进行测序,然后再克隆入高效原核表达载体pBV220,对该重组子的SD序列进行调节后利用温度诱导表达,并测酶的生物活性.结果: 构建了aroB基因的克隆和表达重组子,经SD序列调节后,aroB基因获得高效表达,SDS-PAGE图谱显示新增38.8×103蛋白带,酶活性测定结果表明脱氢奎尼酸合成酶的相对酶活性为5.4.结论: 实现了脱氢奎尼酸合成酶基因在大肠杆菌中的高效表达,为构建产脱氢奎尼酸工程菌种奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴建新	首都儿科研究所生化实验室	64	571	12.0	21.0
2	徐琪寿	军事医学科学院放射医学研究所	61	580	13.0	22.0
3	刘云	军事医学科学院放射医学研究所	20	153	7.0	11.0
4	常会波	首都儿科研究所生化实验室	17	90	5.0	9.0