脱氢奎尼酸合成酶和奎尼酸脱氢酶基因在大肠杆菌中的共表达

• 作者: 周长林 杨毅刚 窦洁
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 脱氢奎尼酸合成酶 奎尼酸脱氢酶 奎尼酸 生物合成
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 367-370
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2636字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5048.2006.04.019

摘要

目的:构建共表达载体pETDuet-aroB-qutB,在大肠杆菌中同时表达奎尼酸合成途径中的关键酶脱氢奎尼酸合成酶(DHQase)和奎尼酸脱氢酶(QDHase).方法:分别以大肠杆菌(B21)和构巢曲霉(ATCC 24919)基因组为模板,采用PCR法扩增得到脱氢奎尼酸合成酶基因aroB和奎尼酸脱氢酶基因qutB,克隆接入pETDuet-1载体中,转化入大肠杆菌BL21,在宿主菌中共表达脱氢奎尼酸合成酶和奎尼酸脱氢酶.结果:获得了包含pETDuet-aroB-qutB共表达载体的重组大肠杆菌.IPTG(0.5 mmol/L)诱导重组菌4 h后,脱氢奎尼酸合成酶和奎尼酸脱氢酶表达量分别占菌体总蛋白的18.7%和30.5%,酶活力为70.4 U/L、40.2 U/L,分别提高了14.1倍和22.3倍.结论:实现了脱氢奎尼酸合成酶和奎尼酸脱氢酶基因在大肠杆菌中的高效共表达,为基因工程法生物合成奎尼酸奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周长林	中国药科大学生命科学与技术学院	80	451	12.0	18.0
2	窦洁	中国药科大学生命科学与技术学院	41	234	9.0	14.0
3	杨毅刚	中国药科大学生命科学与技术学院	2	8	2.0	2.0