人FAM33A基因启动子的克隆与鉴定

• 作者: 兰欢 刘革力 卜友泉 宋方洲 崔涛 杜刚 杨正梅 镇磊
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: FAM33A基因 启动子 转录调控 细胞周期
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 219-224
• 页数: 6页
• 分类号: Q784
• 字数: 4503字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2009.03.007

摘要

目的 鉴定人FAM33A基因的启动子,为进一步研究其转录调控机制奠定基础.方法 采用5'RACE技术(5'端cDNA快速扩增)鉴定FAM33A的转录起始位点.采用PCR定向克隆、酶切亚克隆等策略,构建FAM33A启动子荧光素酶报告基因.采用LipofectamineTM 2000转染H1299细胞,并通过Dual-LuciferaseGA16A Reporter Assay System进行荧光素酶报告基因活性检测.结果 确定了FAM33A的转录起始位点,构建了覆盖FAM33A 5'端ATG附近约2 kb区域的一系列FAM33A启动子荧光素酶报告基因.启动子活性分析表明,这些重组体均具有较高的启动子活性,同时含有典型的GC盒以及Sp1、E2F和GATA-1等潜在的转录因子结合位点.结论 FAM33A启动子区域主要定位于转录起始位点附近约590 bp的区域内.