猪生殖与呼吸综合征病毒分离株dNsp2基因的原核表达

• 作者: 亓传德 刘爽 吴发兴 张志 张燕霞 李晓成 梁继望 阿合买提
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪生殖与呼吸综合征病毒 dNsp2基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 622-625
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 3442字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.07.012

摘要

参考GenBank中收录的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)JXA1株Nsp2基因序列,设计了1对引物用于扩增截短的Nsp2(deleting Nsp2,dNsp2)基因,用BamH Ⅰ+Xho Ⅰ双酶切后将目的基因插入到原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,经SDS-PAGE电泳和Western-blot检测,dNsp2基因得到了高效表达,融合蛋白的分子质量约为36.5 ku,表达产物以可溶性方式存在于表达上清液中,表达量可达菌体总蛋白的30%以上,表达产物能被PRRSV变异株抗体所识别,具有较好的生物学活性.PRRSV变异株dNsp2基因的高效表达为该病毒ELISA检测方法的建立及应用奠定了基础.