2型猪链球菌中国强毒株溶血素样蛋白基因的原核表达及其抗血清制备

• 作者: 唐家琪 潘秀珍 王长军 葛俊超 邵珠卿 韩明月
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 猪链球菌 溶血素样蛋白 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 927-930
• 页数: 4页
• 分类号: R378.1
• 字数: 3198字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2009.10.001

摘要

目的 克隆2型猪链球菌溶血素样蛋白(Hemolysin-like protein, HLP)编码基因并进行原核表达,纯化重组蛋白并制备相应的多克隆抗体.方法 采用PCR法,从2型猪链球菌中国强毒株05ZYH33基因组扩增基因hlp,构建重组表达质粒pET32a::hlp,转化E.coli BL21(DE3),筛选阳性转化子进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定表达产物;His亲和层析柱纯化重组蛋白;重组蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,间接ELISA和Western blot检测多抗血清.结果 构建的重组质粒在宿主菌中可高效表达,His亲和层析柱纯化获得较高纯度的重组蛋白;重组蛋白免疫新西兰兔后获得高效价的抗血清.结论 在原核系统中成功地表达了hlp基因编码的蛋白,并以重组蛋白为抗原制备出高效价的多抗血清,为进一步研究hlp基因的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王长军		134	625	12.0	17.0
2	潘秀珍	南京师范大学生命科学学院	80	452	10.0	17.0
6	葛俊超	南京师范大学生命科学学院	6	27	4.0	4.0
10	韩明月	南京师范大学生命科学学院	2	8	2.0	2.0
14	邵珠卿	南京师范大学生命科学学院	4	15	3.0	3.0