四川S.suis2强毒株溶血素样蛋白HLP序列信息分析及克隆表达产物活性检测

• 作者: 孙雯 郑峰
• 来源期刊: 成都大学学报（自然科学版）
• 关键词: 猪链球菌2型(S.suis 2) 溶血素样蛋白 同源性分析 分子克隆 溶血活性
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 药学与生物工程
• 页码范围: 209-214
• 页数: 6页
• 分类号: S852.5
• 语种: 中文

摘要

对四川猪链球菌2型(S.suis2)强毒株05ZYH33溶血素样蛋白(hemolysin-like protein,HLP)编码基因hlp进行序列信息分析、分子克隆表达及溶血活性检测,深入探讨HLP的致病机制.用Blast和Clustal X程序对HLP进行基因同源性分析,用SignalP 4.1和TMHMM Server 2.0分析HLP氨基酸序列.设计合成hlp引物进行PCR扩增,先后将hlp克隆入pMD-18T载体和pET30a表达载体中,构建pET30a::hly原核表达质粒.将重组质粒转化至E.coli BL21中诱导表达,并对重组HLP蛋白进行纯化和溶血活性检测.同源性分析表明HLP与多种具有溶血活性的蛋白相似性较高.氨基酸序列分析发现HLP具有信号肽和跨膜区,且由DUF21、CBS和CorC-HlyC3部分组成.序列测定显示hlp片段全长1 335 bp,编码445个氨基酸.重组质粒经诱导表达和纯化后电泳显示,HLP分子量约为70 kDa,具有溶血活性.结果表明,HLP是一个膜结合蛋白,不同于能够分泌到细胞外的溶血素Suilysin.重组HLP具有一定的溶血效价.此可能与致病相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑峰		4	6	1.0	2.0
2	孙雯	扬州科技学院医学院	7	7	1.0	2.0