双链置换探针实时荧光定量PCR结合融解曲线特性分析检测高危型人乳头瘤病毒16、58亚型

• 来源期刊: 交通医学
• 学科: 医学
• 关键词: 双链置换探针 实时荧光定量PCR 人乳头瘤病毒(HPV) 融解曲线 宫颈癌
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著与基础研究
• 页码范围: 493-496
• 页数: 4页
• 分类号: R730.45
• 字数: 2755字
• 语种: 中文

摘要

目的:建立一种准确、快速、实用的检测人乳头瘤病毒(HPV)16、58亚型的方法.方法:根据HPV16和HPV58亚型的序列特异性各设计一对引物和一对型特异性双链置换探针,采用实时荧光PCR扩增后,通过非高分辨的融解曲线分析在同一荧光通道内有效区分两种HPV DNA基因亚型.结果:1ng/μl、0.1ng/μl和0.01ng/μlHPV 16和HPV 58模板荧光PCR扩增及融解曲线分析显示,融解曲线分析较定量扩增更灵敏、特异.HPV 16和HPV 58融解曲线对应的Tm值分别为83.5℃和87℃.结论:所建双链置换探针实时荧光定量PCR结合融解曲线分析检测HPV 16、58亚型的方法灵敏、特异,有临床应用价值.