表达H5N1亚型猪流感病毒HA基因重组腺病毒的构建及其免疫原性

• 作者: 乔传玲 吴运谱 展小过 杨焕良 辛晓光 陈化兰 陈艳
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流感病毒 H5N1亚型 HA基因 重组腺病毒
• 年，卷（期）: 2009,（9）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1363-1369
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 5028字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2009.09.013

摘要

RT-PCR扩增猪流感病毒A/Swine/Fujian/1/2001(H5N1)株的HA基因,构建重组腺病毒穿梭质粒pDC315-H5HA-EGFP.采用Ad-Max同源重组系统和共转染技术,构建了表达H5N1亚型猪流感病毒HA基因的复制缺陷型重组腺病毒(rAd-H5HA-EGFP).经目的基因PCR检测及序列测定,结果表明:HA基因已经正确地插入到腺病毒的基因组中;通过RT-PCR检测与Western blot分析,结果表明:HA基因能够进行正确转录,并且所表达的蛋白具有相应的生物学活性.子代重组腺病毒rAd-H5HA-EGFP经增殖、纯化后感染性滴度可达2.26×1010 TCID50 mL-1.rAd-H5HA-EGFP免疫BALB/c小鼠能够诱导特异性的HI抗体产生,有效阻止病毒在体内的复制.